Major Mouse Testing Program: Longevity

Santé
Major Mouse TestingLongévité
Program:
Longevity
10/03/2015
Mapeando efeitos a longo prazo na saúde:
Teste em larga escala em camundongos idosos
usando terapias promissoras contra o
envelhecimento e doenças relacionadas
1
Dedicamos esta apresentação a L. Stephen Coles,
M.D., Ph.D. (19/01/1941 – 03/12/2014) pioneiro na
área de gerontologia e na pesquisa do
envelhecimento.
Stephen Coles colocou em contato especialistas
americanos em camundongos com o grupo de
voluntários desse projeto para terem discussões
técnicas e ver o que poderia ser feito.
Por anos, Dr. Coles administrou a lista de e-mail
Gerontology Research Group, que serviu como
grande fonte de inspiração para esse projeto.
10/03/2015
Major Mouse Testing Program
2
Longevidade: A revolução
•
•
•
•
Revolução
ocorreu em
nematoides
( C. elegans )
PASSADO
Descoberta revolucionária em 1980: 8 maneiras de aumentar a longevidade [1]
1993: Uma mutação dobra expectativa de vida e confere grande vitalidade [2]
2003: Milhares de testes realizados; ~10% aumenta a longevidade [3]
2008: Uma mutação aumentou a longevidade em quase 10 vezes !
Vermes e
camundongos
envelhecem de
forma diferente
• Vermes têm um nº fixo de células: manter a viabilidade celular é a chave
• Camundongos são mamíferos e a regeneração tecidual é a chave
A revolução da
longevidade está
ocorrendo em
camundongos e
é promissora
para humanos
• A revolução está chegando em camundongos, mas poucos testes foram feitos
• Tratamentos conhecidos que aumentam a longevidade de camundongos
tiveram efeitos benéficos em humanos (aspirina, metformina, metoprolol,
rapamicina)
• Padrões genéticos de aumento de longevidade em camundongos foram
encontrados em famílias humanas longevas (Larron-dwards, Foxo-3A, akt-1)
Ajude-nos a realizar múltiplos testes em camundongos,
para que possam ser aplicados para humanos
PRESENTE
futuramente
10/03/2015
Major Mouse Testing Program
3
Resumo do programa
Duração
•1ª série de experimentos em
animais adultos com duração de
18 meses
• Na outra série será preciso construir
novas linhagens, demorando 38 meses
Resultados serão checados 3x para que
possam ser testados em humanos. A maior
parte dos resultados virá 5 anos após o
início do programa.
Pessoas
envolvidas
Contactamos
diferentes
pesquisadores e identificamos
grupos de laboratórios com
forte experiência em animais,
teste de longevidade e em
medicina regenerativa
Orçamento
Custo estimado para
os 1000 diferentes
testes é de €20M.
Há uma correlação direta entre
o financiamento, o nº de testes
e o cronograma do projeto.
Resultados esperados
D
De 1000 testes esperamos 100 resultados positivos:
-Nematoides:10% de testes positivos (muitos testes já feitos)
- Em camundongos, ~10% (difícil de estimar: poucos testes feitos)
Benefícios esperados:
1. Mudar pensamento da sociedade em todos seus níveis
2. Resultados devem trazer uma visão global sobro que aumenta a longevidade
3. Esperamos atingir um robusto aumento da longevidade
4. Esperamos que alguns tratamentos sejam aplicáveis em humanos
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Major Mouse Testing Program
Aplicação em estudos de
longevidade em humanos
Iniciando o programa esse ano,
esperamos resultados robustos
em menos de 10 anos.
4
O que testar: Intervenções por origem
Resultados parciais
Outras ideias
Longevity DB: mais de 1000 intervenções
Banco de dados lista genes humanos estatisticamente
correlacionados com longevidade.
 Para muitos genes, a causalidade pode ser testada
em camundongos: http://longevitydb.org/browse
Grupo no Facebook:
“PotentialGerontodrugs”
Atualmente mais de 300 posts
 Cada post contém uma intervenção em
potencial para ser testada em camundongos
https://www.facebook.com/groups/gerontodrugs
Lifespan Observation Database
Outras fontes
3359 intervenções que aumenta longevidade: em
roedores (114; alguns indefinidos, mas com resultados
promissores), nematoides (2400), outras especies
 Confirmações futuras precisam ser feitas em
camundongos: http://lifespandb.sageweb.org
Outros bancos de dados parecidos foram
encontrados. Fóruns e listas de e-mails foram
analisados. Circulamos também em conferências
da área um trabalho para listarmos ideias.
.
O número total de intervenções é grande. Análises para determinar prioridades está
em andamento
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Major Mouse Testing Program
5
O que testar: Intervenções por classe
Tratamentos com drogas já
usadas em humanos
Resultados de pesquisas
Tratamentos já usados em humanos
e que acabam favorecendo uma vida
saudável. Conceito: Se camundongos
viverem mais e melhor com certa
droga, é um forte argumento para
que esta esteja de forma causal
melhorando a saúde de pessoas.
Normalmente resultados in vitro e in
vivo de camundongos, ratos,
nematoides, ou mosca-da-fruta,
precisam de confirmações de
aumento robusto da longevidade e
saúde – para que possam ser
extrapoladas para humanos
Diversas terapias
em
camundongos
Variações genéticas em
humanos
Variações
encontradas
em
populações humanas que acabam
favorecendo uma vida saudável,
podendo ser testadas através de
terapia gênica em camundongos
idosos. Conceito: Se camundongos
viverem mais e melhor, é um forte
argumento para que essa variação
melhora a saúde humana de forma
causal, e que futuramente terapia
gênica pode ser efetiva também.
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Terapia gênica
Banco de dados
em camundongos
Major Mouse Testing Program
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Cronograma geral
TESTES INICIANDO COM CAMUNDONGOS IDOSOS
Fase I
1 ano
Fase II
2 meses
Fase III
14 meses
Preparação de Teste com 40 a
equipamentos 400 terapias
Formação de times,
financimento e
investigação de
técnicas
Fase IV
18 meses
Confirmação e
otimização de
resultados
Fase V
18 meses
Início de
protocolos
em humanos
TESTES INICIANDO COM NOVA LINHAGEM DE CAMUNDONGO
2 meses
38 meses
Preparação de Teste com 60 a
equipamentos 600 terapias
18 meses
Confirmação e
otimização de
resultados
18 meses
Início de
protocolos
em humanos
O cronograma da Fase III está detalhado no
próximo slide
Número de intervenções
testadas depende do
financiamento
10/03/2015
2 m€  ≈100 terapias testadas  ≈10 resultados positivos
20 m€  ≈1000 terapias testadas  ≈100 resultados positivos
A estimativa financeira encontra-se no slide 17. Contém também o
número de testes previstos dependendo do financiamento obtido.
Major Mouse Testing Program
7
Fase III
6 meses
preparação
30 machos
30 fêmeas
18 meses
?
14 meses
18 meses de idade:
Início do tratamento
Nascimento
Resultados positivos da
Fase III levarão a Fase
IV, que é parecida com
a Fase IIIb : validação
em roedores idosos de
outros laboratórios +
estudo dos diversos
efeitos na saúde
32 meses de idade:
Houve aumento da
longevidade em relação ao
grupo controle?
 Decisão para próximos
passos
Fase IIIa: Inicia-se criando linhagens novas.
Maioria genética & muitas ‘outras’ terapias.
10/03/2015
Fase IIIb: Teste Real!
Drogas, genética,
outros
Major Mouse Testing Program
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Organização Geral
Doadores
Resultados
Financiamento
Grupo
Longévité Santé, ILA
Produtores de
camundongos
10/03/2015
Camundongos
Major Mouse Testing Program
Instalações/
Facilities
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Lista: “Para-Fazer”
Escolher intervenções em
potencial
Refinar
metodologia
Em progresso…
Presente
Em progresso…
Identificar fontes
de financiamento
Laboratórios necessários
para realização do projeto e
fazer acordos com estes
Contactar investidores em
potencial
Fazer acordos gerais
Calcular custos dos
experimentos (equipamentos
e mão-de-obra)
Negociações financeiras
mais detalhadas
Em progresso…
Coletar o necessário
para começo do programa
10/03/2015
Major Mouse Testing Program
Futuro
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Times e laboratórios
Laboratórios: 1. Equipados com estrutura de altíssima qualidade para animais
(gaiolas com filtros individuais com ventilação) e 2. Especializados em
medicina regenerativa, e em áreas relacionadas com o envelhecimento
•
Arlan Richardson
– 40 anos de experiência em testes de longo prazo com
roedores (compostos e terapia gênica)
– Laboratory USA (Oklahoma)
•
Alexandra Stolzing
– Medicina regenerativa & células-tronco
– Translational Centre for Regenerative Medicine
Leipzig University (Leipzig)
• Jean-Marc Lemaitre
– Medicina regenerativa em camundongos e células humanas
(células-tronco e terapia gênica)
– Inserm na França (Montpellier)
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Major Mouse Testing Program
11
Time de voluntários
Agradecimento especial ao time de voluntários:
Time principal:
Edouard Debonneuil, Rached Messaoudi,
Valentin Socolov, Martin Dinov, Daniel
Krochmal, Maciej Michalak, Nicoleta Reinald
Assistência de:
Steve Coles (finado), Johnny Adams, Daria Khaltourina,
Matthew Scholz, Didier Coeurnelle, Anton Kulaga, Paul
Spiegel, Liz Parrish, Alexandru Chircu, Alexandre Blanc,
Dmitri Borisoglebsky, Victor Björk,… e tantos outros
pesquisadores e voluntários da internet.
▲Longévité & Santé: Encontros semanais
para organizar o projeto em La Paillasse,
Paris.
◄contribuidores de diferentes países em diferentes ocasiões
10/03/2015
Major Mouse Testing Program
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Obrigado por sua atenção!
Versões atualizadas dessa apresentação:
http://longevityalliance.org/Projects/MajorMouseTestingProgram
Caso queira ajudar,
•
Doações via paypal em [email protected]
–
•
De outras maneiras através do IBAN: FR7630003040400003726544034
Contato [email protected] para propor ajuda em pontos
específicos
O que precisamos mais especificamente:
–
–
–
–
Se você tiver experiência em testes de longevidade em camundongos, ou terapia gênica in vivo, ou
incorporação de drogas na comida, ou se pude ajudar nos desenhos experimentais do projeto.
Se você souber fontes de financiamento em potencial que possam ajudar, ou se você estiver interessando
em escrever projetos de financiamento por favor, não hesite em nos contactar
Apresentação do projeto em conferências ou tradução dos slides para outras línguas.
Contatos para organizações registradas em seu país, sem fins-lucrativos, pró-longevidade com vantagens
fiscais para seus doadores, que possam querer financiar o projeto.
P.S: Estamos cientes que alguns links e e-mails desse slide não essão homogêneos. Estamos melhorando isso para as
futuras versões. Para esclarecimentos, SLS é Sceaux Longévité Santé, e ALA é o American Longevity Alliance,
afiliações sem fins-lucrativos da International Longevity Alliance localizada na França e nos EUA, respectivamente.
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Major Mouse Testing Program
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Apêndice
•
•
•
•
Recapitulação em 3 slides
Lista de terapias para testar em camundongos
Técnicas de terapia gênica
Outros
10/03/2015
Major Mouse Testing Program
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Hoje existem menos de 10 estudos de longevidade em
camundongos por ano. Objetivo: 1000 testes em menos
de 5 anos
•
•
Em nematoides, 10% dos milhares de testes foram positivos
Em camundongos, também 10% [5/67 por Spindler. S e 5/15 por ITP, 1-2 em comum]:
• Programa de intervenções, EUA: - NDGA (machos, +10%)
- Rapamicina (machos, & fêmeas, +10-25%)
- Aspirina (machos, +10%)
- Acarbose (machos, +22%)
- α-Estradiol (machos, +10%)
Aspirina: baixa
mortalidade em
humanos (80 mg/dia,
≥5 anos)
Everolimo : em teste em
idosos(resistência de
vacina contra gripe)
Metformina: diminui a
mortalidade em
humanos
•
Outros resultados estão sendo checados em roedores (Fulereno)
10/03/2015
Major Mouse Testing Program
15
Resultados esperados
Descobertas em camundongos têm grande potencial para avançar
saúde humana a longo prazo
Alterar a forma que a sociedade pensa
1
“A biologia aplicada está emergindo” em relação as inúmeras terapias que previnem ou revertem/silenciam
o envelhecimento. Podemos então, aumentar a longevidade do camundongo de forma robusta?
Quebra de paradigma na ciência da longevidade
2
Guiar pesquisas para o que realmente aumenta a longevidade. Destacar mecanismos envolvidos.
Em conjunto com estatísticas em humanos, esperamos que os resultados possam ser aplicáveis em até 5
anos
Grande aumento da longevidade
3
Dos muitos resultados, esperamos que alguns aumentem a longevidade de forma drástica
Nova área farmacêutica: “saúde a longo prazo”
4
Aplicação de drogas já existentes para o envelhecimento e doenças relacionadas
10/03/2015
Major Mouse Testing Program
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Financiamento e Orçamento
• Nota:
Custos estão sendo recalculados. De qualquer maneira, o número de testes será ditado pela quantidade
de financiamento
Fase III
•
•
•
•
Consideremos que 400 terapias serão testadas em camundongos idosos e 600 terapias exijam novas
linhagens; sendo que cada terapia precisa de 60 animais (30 machos e 30 fêmeas) e cada um dos dois
sistemas (animais envelhecimentos/linhagens novas) precisam de um controle de 1000 camundongos
(desenho assimétrico; 50% macho-fêmea).
Consideremos que o manuseamento custa ~1.5€ por animal/semana (dependendo das condições) e
que cada animal viva em média 27 meses. Um cálculo rápido indica que o custo total do
manuseamento é de 1.5*(27*(600*60+1000)+9*(400*60+1000))*(30.5/7) = 8 M€
Consideremos que cada animal idoso custa 100€ e que cada animal transgênico custa 30€ para ser
gerado. O custo inicial do camundongo é de (600*60+1000)*100+(400*60+1000)*30 = 4.5 M€
Custo total para a Fase III é de 12.5 M€
Fase IV
•
Consideremos que 10% das terapias testadas na Fase III sigam para a Fase IV, e que em média, cada
terapia na Fase IV custará 6 vezes o custo da Fase III (esse aumento de longevidade precisa ser
confirmado e refinado). O custo total da Fase IV é de 12.5*10%*6 = 7.5 M€
Total
O custo total das 1000 terapias seria então 12.5+7.5 = 20 M€, com os cáculos acima. As principais fontes
de
gastos foram detalhados acima. Major Mouse Testing Program
10/03/2015
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Terapias para testar em camundongos
•
A
L
T
A
P
R
I
O
R
I
D
A
D
E
M
É
D
I
A
Exemplos de terapias extraídas do grupo do Facebook
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
Controles de aumento da longevidade: aspirina, metformina, rapamicina, estatinas
Snell, Ames, mutações de IGF-1 em idade avançada
TA-65, ativador de telomerase, e variante humana de telomerase
TM5441(Aumenta 4x a longevidade em camundongos; reduz níveis de PAI, marcador de
senescência)
Centrofenoxino/Meclofenoxato: reduz níveis de lipofuscina e aumenta longevidade de ratos
Farmacoperonas (inverte a mutação em GNRHR)
Suplementação de Neuraminidase 1 (reduz parcialmente a doença de Alzheimer)
Injeções de GDF11 (reduz parcialmente envelhecimento no coração e cérebro de camundongos)
D-Glucosamina (mimético da restrição calórica, aumenta longevidade de camundongos idosos)
Dimetilaminoetanol (aumenta longevidade; falta testar doses mais baixas)
Trealose (induz autofagia; altera via de IGF-1; elimina proteínas neurodegenerativas)
Destruição de 7-cetoColesterol com LysoSENS’s (Em breve pronta pra testes)
Estabilização genética da estrutura da transtiretina
... [MUITAS OUTRAS]
–
–
–
–
–
Bifosfonatos (usados contra osteoporose, mas parece reduzir a longevidade por outras vias)
Suplementação de fulereno em ratos (90% de aumento da longevidade)
Tafamidis (tratamento de doença familiar de transtiretina)
Suplementação de NAD+
... [MUITAS OUTRAS]
3/10/2015
Major Mouse Testing Program
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Outras intervenções promissoras
1. Variações genéticas humanas  terapia gênica em camundongos. Variações encontradas em populações
humanas que acabam favorecendo uma vida saudável, e que podem ser testadas através de terapia gênica em
camundongos idosos. Conceito: Se camundongos viverem mais e melhor, é um forte argumento que essa variação
melhore a saúde humana de forma causal, e que a terapia gênica possa ser efetiva também.
2. Tratamento com drogas já usadas em humanas  tratamento de drogas em camundongos. Tratamentos usados
em humanos e que acabam favorecendo uma vida saudável. Conceito: Se camundongos viverem mais e melhor
com certa droga, é um forte argumento para que esta melhore de forma causal a saúde de pessoas.
3. Resultados de pesquisas  diversas terapias em camundongos. Normalmente resultados in vitro e in vivo de
camundongos, ratos, nematoides ou moscas-da-fruta, precisam de confirmações de aumento robusto da
longevidade e saúde – para que possam ser extrapoladas para humanos
10/03/2015
Major Mouse Testing Program
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Exemplo:
transpor rs9330200
rs9330200 é uma variação genética humana codifica para a proteína tubulina beta4b. A variante corresponde em ter
um T no lugar de um C em algum ponto. Foi encontrado no estudo Framingham Heart Study. Cidadões
americanos com duas cópias desta variante tiveram menor risco de doenças cardiovasculares, de câncer e de
morte prematura de maneira bastante significativa (p_value = 6e-53)
Referência: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3592948/
Camundongos têm o mesmo gene! ("ortólogo") indicando que tem a mesma função. Naturalmente, eles tem um "C",
e não um "T". Por isso, queremos dá-los essa mesma variante: parte do gene do camundongo é:
"GCCGCATGTCTATGAAGGAGGTGGACGAACAGATGCTTAATGTCCAAAACA« , e o objetivo é transformá-lo em
"GCCGCATGTCTATGAAGGAGGTGGATGAACAGATGCTTAATGTCCAAAACA" usando técnicas de CRISPR. Se isso
aumentar sua longevidade… (melhorar a saúde, etc) é uma confirmação de que funciona em humanos…
Objetivo é testar rs933020200 e também muitos outros candidatos (temos mais de 1400 candidatos!). O que vier de
estudos em humanos e for confirmado em camundongos tem grandes chances de funcionar em nós
Depois de 5 anos algumas pessoas (primeiramente talvez pacientes e idosos) começarão a fazer a terapia gênica e
serem monitorados quanto sua saúde.
Potencialmente em 10 anos será frequente usar terapia gênica para esses genes para melhora da saúde.
10/03/2015
Major Mouse Testing Program
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Terapia Gênica em animais idosos: técnicas
1. Linhagens sensíveis a drogas
Por que usar linhagens específicas e não tratar linhagenes “normais”?
Especialistas nos disseram que técnicas existentes de terapia gênica afetam uma minoria do corpo:
mesmo se o ‘gene da longevidade’ for introduzido, é incerto se terá efeito pronunciado; usando
essas técnicas, há o risco de ‘desgastar’ o programa  Eles sugeriram gerar linhagens sensíveis a
drogas (http://www.clontech.com/US/Products/Inducible_Systems/Protein)
Técnica
Passo 1 (6 meses): para cada variante genético a ser testado, uma linhagem
será contruída; embriões incorporaram a variação com um promotor ativado
por drogas usando a técnica de CRISPR e é implantado em fêmeas. A progenia
que tiver a mutação é testada; se estiver OK é cruzada para gerar 30 machos e
30 fêmeas para análise da sobrevida.
Passo 2 (18 meses): animais são mantidos e alimentados normalmente.
Devem se comportar que nem o controle porque a variação não está expressa.
0
Passo 3 (14 meses): Após 18 meses, são alimentados com a droga que ativa o
gene. Curva de sobrevivência é comparada com o controle.
30 machos
30 fêmeas
?
18
32
P.S: Não abandonamos o tratamento de animais idosos normais:
a) Após esses 38 meses, fase IV: para os casos (10%?) com aumento estatístico da longevidade, a
variação é testada em animais idosos usando técnicas diferentes (próximos slides)
b) Em paralelo nesses 38 meses, técnicas de terapia gênica (próximos slides) já são testadas para
genes estabelecidos de longevidade, sendo uma forma de treinar para a)
3/10/2015
Major Mouse Testing Program
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Terapia Gênica em animais idosos: técnicas
2. Terapia gênica com 18 meses: Alteração genética
mediada por vírus
Contexto
Muitas técnicas podem alterar genes in vivo. Especialistas sugerem que usemos o “AdenoAssociated Virus” (AAV). Esses vírus incorporam parte de seu DNA no DNA do hospedeiro infectado.
Nas últimas décadas, alguns desses foram selecionados para uso científico para serem aplicados em
diferentes órgãos: AAV1,AAV2..AAV9. Ex: usaremos como padrão AAV9, por ter tropismo para
tecido neural.
Técnica
Passo 1 (2 meses): Para cada variação genética a ser testada, o AAV incorpora
o gene com a técnica de CRISPR sendo injetado em: 1.animais jovens para
testar se espalha-se e 2. em 30 machos e fêmeas de 18 meses
Passo 2 (14 meses): Sobrevida dos camundongos envelhecidos é comparada
com o grupo controle.
teste
Limitantes
AAV
30 machos
30 fêmeas
?
18
32
Baixa eficiência: Uma pequena fração de células recebe AAVs e uma menor
ainda tem o constructo no núcleo: a chance de agir de forma suficiente para aumentar a
longevidade é baixa. Ainda assim, terapia gênica de telomerase já foi descrita com esse método.
Aplicação terapêutica: Frequentemente, adultos são infectados por AAVs durante suas vidas. Para
esses, a terapia poderia resultar em uma resposta imune que tornaria a terapia pouco eficaz.
Pessoas saudáveis podem hesitar em usar essas terapias.
(*) Bernardes de Jesus B. et al. (2002) http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/emmm.201200245/full
3/10/2015
Major Mouse Testing Program
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Terapia Gênica em animais idosos: técnicas
Contexto
3. Expressão transiente após 18 meses:
Minicírculos contendo vetor lipossomal
Minicírculos são círculos de DNA. Em camundongos, eles não afetam necessariamente um nº de
células maior que AAVs, mas eles não geram respostas imunes – tornando-se uma abordagem
translacional mais eficaz. Um problema é que em células em divisão o efeito é transiente,
necessitando do uso de constantes tratamentos.
Técnica
Passo 1 (2 meses): Para cada variação a ser testada minicirculos contendo
o gene são produzidos em quantitade suficiente usando bactéria modificadas
(um plasmidio é criado em E. coli, suas partes procarioticas são removidas
= minicírculo: sem resposta imune); são então incorporados em vetores
lipossomais (que tem minicírculos) e injectados em animais jovens para testar
sua distribuição.
Passo 2 (14 meses): Os minicírculos são injetados em 30 machos e 30 fêmeas,
a cada duas semanas, iniciando aos 18 meses de idades. A sobrevida é
comparada com a do grupo controle
E. coli
teste
30 machos
30 fêmeas
?
18
32
Nota
Evoluções: A área está mudando rapidamente. Esses slides são, portanto, indicativos: nós podemos
escolher melhores técnicas quando/se essas aparecerem e se tornarem robustas (microcírculos,
elementos S/MAR…).
3/10/2015
Major Mouse Testing Program
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Terapia Gênica em animais idosos: técnicas
4. Outros
Uma questão de tecido-específico
Para a maioria das variações genéticas que queremos testas, não sabemos à priori se afetar algum
tecido em específico faria sentido. Ex: uma mutação familiar pode estar associada com aumento
longevidade em diferentes população sem saber se esses efeitos são através de certos tecidos.
Por isso, os slides anteriores eram sobre técnicas gerais: Ex: que são expressas em todo o corpo.
Nesses casos, a não ser que já tenha sido demonstrado que o gene aumenta a longevidade,
iniciaremos com a técnica longa #1: gerar a linhagem e esperar por sua longevidade.
Para casos específicos que certo órgão deve ser afetado, a terapia gênica pode ser bem mais eficiente.
Esse é o caso para célular do sangue e do fígado
Uma área que cresce rápido
Como dito no último slide, técnicas de terapia gênica estão melhorando
 Pode acontecer que após 6 meses do início dos experimentos, alguma técnica melhor apareça.
Mas, seria muito pior esperar décadas para iniciar os experimentos.
 Pode acontecer também que a técnica #1 seja uma maneira artifical para modelar uma futura
terapia gênica que estará disponível para idosos daqui cinco ou dez anos. Nessa perspectiva, essa
técnica seria muito melhor que outras (AAVs, minicírculos, ou outras terapias pouco efetivas)
3/10/2015
Major Mouse Testing Program
24
Referências
As seguintes referências correspondem ao slide nº3
A “revolução da longevidade” em C elegans
[1] Klass MR (1983). "A method for
the isolation of longevity mutants in the
nematode Caenorhabditis elegans and
initial results". MECHANISMS OF
AGEING AND DEVELOPMENT 22 (34): 279–286. PMID 6632998
[2] Kenyon C, Chang J, Gensch E,
Rudner A, Tabtiang R (1993). "A
C. elegans mutant that lives twice
as long as wild type". Nature
(journal) 366 (6454): 461–
464. PMID 8247153
[3] Lee SS, Lee RY, Fraser
AG, Kamath RS, Ahringer
J, Ruvkun G (2003). A
systematic RNAi screen
identifies a critical role for
mitochondria in C. elegans
longevity. NAT GENET.
PMID 12447374
[4] Ayyadevara S, Alla R, Thaden
JJ, Shmookler Reis RJ (2008).
"Remarkable longevity and stress
resistance of nematode PI3K-null
mutants". AGING CELL 7 (1): 13–
22. PMID 17996009
A futura “revolução da longevidade” em camundongos
Bartke A, BrownBorg H (2004). Life
extension in the dwarf
mouse. CURR TOP
DEV BIOL. 63:189225. PMID 15536017
10/03/2015
Harrison, D. E., Strong, R., Sharp, Z. D.,
Nelson, J. F., Astle, C. M., Flurkey, K.,
Nadon, N. L., Wilkinson, J. E., Frenkel, K.,
Carter, C. S., Pahor, M., Javors, M. A.,
Fernandez, E. and Miller, R. A. (2009)
Rapamycin fed late in life extends lifespan
in genetically heterogeneous mice.
NATURE 460:392-395. PMID 19587680
Spindler SR, Mote PL, Li R,
Dhahbi JM, Yamakawa A, Flegal
JM, Jeske DR, Li R, Lublin AL
(2013). β1-Adrenergic receptor
blockade extends the life span of
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