CRAVO-DA-INDIA ÓLEO VOLÁTIL Caryophylli flos

CRAVO-DA-INDIA ÓLEO VOLÁTIL
Caryophylli flos aetheroleum
Óleo volátil de botões florais secos de Syzygium aromaticum (L.) Merr. & L.M. Perry, contendo, no
mínimo, 75% de eugenol (C 10 H 12 O 2 , 164,20).
PREPARAÇÃO
Óleo volátil obtido por arraste de vapor d’água.
CARACTERÍSTICAS
Líquido amarelo intenso com odor de eugenol, que se torna marrom quando exposto ao ar.
ENSAYOS DE IDENTIFICAÇÃO
Cromatografía
A. Proceder conforme descrito em Cromatografia em camada delgada em Métodos gerais.
Fase estacionária: emplear una placa recubierta con sílica-gel GF254 de 0,25 mm de espesor.
Fase móvel: tolueno.
Solução amostra: dissolver 3 µL da amostra a ser examinada em 300 µL de tolueno.
Solução referência: dissolver 1,5 µL de eugenol e 2 mg de acetato de eugenila em 200 µL de
tolueno.
Revelador: misturar, na ordem, 0,5 mL de anisaldeído, 10 mL de ácido acético glacial, 85 mL de
metanol e 5 mL de ácido sulfúrico.
Procedimento: aplicar na cromatoplaca, separadamente, em forma de banda, 20 L da Solução
Amostra e 15 L da Solução Referência. Desenvolver duas vezes, após repouso de 5 minutos.
Desenvolver o cromatograma por 10 cm. Remover a cromatoplaca e deixar secar ao ar por 15
minutos. Observar o cromatograma sob luz ultravioleta 254 nm. Após, nebulizar a placa com
solução de anisaldeído e aquecer entre 100 °C e 105 °C durante 5 a 10 minutos.
Resultados: os esquemas abaixo apresentam a sequência de zonas presentes no cromatograma
obtido com a solução de referência e a solução amostra. Outras zonas podem ocasionalmente estar
presentes.
Parte superior da placa
Eugenol: zona com extinção
de fluorescência
Zona com extinção de
fluorescência (eugenol)
Acetato de eugenila: zona com
Zona com extinção de
extinção de fluorescência
fluorescência (acetato de eugenila)
Solução referência
Solução amostra
Parte superior da placa
Zona de coloração violetaavermelhada
Eugenol: zona de coloração
castanho-violeta
Zona de coloração castanhovioleta (eugenol)
Acetato de eugenila: zona de
coloração castanho-violeta
Zona de coloração castanhovioleta
Solução referência
Solução amostra
B.Proceder conforme descrito em Cromatografia a gás em Métodos gerais. Utilizar cromatógrafo
provido de detector de ionização de chamas; coluna capilar de 30 m de comprimento e 0,25 mm de
diâmetro interno, preenchida com polietilenoglicol, com espessura de filme de 0,25 μm. A
temperatura do injetor deverá ser ajustada para 270 °C, a temperatura do detector para 270 °C e a
temperatura da coluna programada para iniciar em 60 °C durante 8 minutos, com incremento de 60
°C a 180 °C a 3 °C por minuto, durante 5 minutos (total: 53 min). Usar nitrogênio purificado como
gás de arraste (1 mL/minuto).
Solução amostra: dissolver 0,2 g do óleo volátil em 10 g de n-hexano.
Solução referência: dissolver 7 mg de β-cariofileno, 80 mg de eugenol e 4 mg de acetato de
eugenila em 10 g de n-hexano.
Procedimento: injetar volume de 1 μL da Solução amostra e da Solução referência no cromatógrafo
a gás, utilizando divisão de fluxo de 1:50 e a concentração relativa obtida por integração eletrônica
pelo método de normalização.
Examinar o perfil cromatográfico da Solução amostra. Os picos característicos no cromatograma
obtido com a Solução amostra deverão ter tempos de retenção similares àqueles obtidos com o
cromatograma da Solução referência ou a identificação confirmada com a cromatografia à gás
acoplada a detector seletivo de massas, operando nas mesmas condições que a cromatografia a gás
com detector por ionização de chama.
Adequabilidade do sistema
Resolução entre picos: mínimo 1,5 entre os picos referentes ao eugenol e acetato de eugenila.
Número de pratos teóricos: no mínimo 30 000, calculados para o pico referente ao β-cariofileno a
110 ºC.
Utilizando os tempos de retenção determinados a partir do cromatograma obtido com a solução
referência, localizar os compostos no cromatograma obtido com a solução amostra. Desconsiderar o
pico do n-hexano.
Verificar a presença, no cromatograma obtido com a Solução amostra, o teor das seguintes
substâncias: β-cariofileno: 5,0-14,0%; eugenol: 75,0-88,0% e acetato de eugenila: 4,0-15,0%.
TESTES
Determinação da densidade relativa. A 20 °C, no mínimo, 1,030 e, no máximo, 1,063.
Determinação do índice de refração. A 20 °C, no mínimo, 1,528 e, no máximo, 1,537.
Determinação do poder rotatório. No mínimo, 0° e, no máximo, -2°.
Solubilidade em etanol. Dissolver em proveta com rolha de 25 mL, 1 mL de amostra a ser
analisada e adicionar com bureta, frações de 0,1 mL de etanol (70 por cento v/v), até completa
dissolução do óleo. Após, continuar a adição de etanol em frações de 0,5 mL até completar 20 mL,
agitando energicamente a cada adição de etanol. A amostra é solúvel em 2 volumes de etanol (70
por cento v/v).
Óleos fixos e óleos voláteis resinificados. Deixar cair uma gota da amostra num fragmento de
papel de filtro; a gota evapora-se completamente em 24 horas sem deixar mancha translúcida ou
gordurosa.
ENSAYOS DE CONTAMINANTES
Metais tóxicos e arsênio. Debe cumplir con los requisitos.
EMBALAGEM E ARMAZENAMENTO
Em recipientes hermeticamente fechados, ao abrigo da luz, do calor e da umidade.
ROTULAGEM
De acordo com a legislação vigente.
Cromatograma ilustrativo obtido com óleo volátil de Syzygium aromaticum (L.) Merr. & L.M.
Perry, por cromatografia à gás acoplada a detector de ionização de chama. 1- β-cariofileno, 2–
eugenol e 3- acetato de eugenila.