No Slide Title

Méd. Veterinário - Hifarmax
Filipe Nunes
TESTE DE CAMPO
LOQUE AMERICANA
Transmitida pela
alimentação das
larvas
Visível apenas nas
fases terminais
Esporos muito
resistentes
Controle caro
„
Filipe Nunes_Set2005
„
„
„
Paenibacillus larvae
larvae
„
LOQUE AMERICANA
Filipe Nunes_Set2005
„
Criação irregular
SINTOMAS DA LOQUE AMERICANA
Filipe Nunes_Set2005
„
„
Criação irregular
Operculação concava
SINTOMAS DA LOQUE AMERICANA
Filipe Nunes_Set2005
„
„
„
Criação irregular
Operculação concava
Operculação perfurada
SINTOMAS DA LOQUE AMERICANA
Filipe Nunes_Set2005
„
„
„
„
Criação irregular
Operculação concava
Operculação perfurada
Larva castanha
SINTOMAS DA LOQUE AMERICANA
Filipe Nunes_Set2005
„
„
„
„
„
Criação irregular
Operculação concava
Operculação perfurada
Larva castanha
Larva viscosa
SINTOMAS DA LOQUE AMERICANA
Filipe Nunes_Set2005
„
„
„
„
„
„
„
Criação irregular
Operculação concava
Operculação perfurada
Larva castanha
Larva viscosa
Escamas
Odor
SINTOMAS DA LOQUE AMERICANA
É necessário reagir rapidamente: A Loque
Enviar amostras para o laboratório: Mas em
Aguardar a resposta do laboratório:
Doença de declaração obrigatória: Uma vez
„
„
„
„
Filipe Nunes_Set2005
do conhecimento do laboratório as medidas previstas devem ser
seguidas - queimar
Normalmente demorada
condições apropriadas e por um meio rápido
pode espalhar-se rapidamente a todo o apiário
criação têm sintomas semelhantes
Sintomas duvidosos: Algumas outras doenças da
„
Problemas com a detecção da Loque Americana
Derivado dum teste laboratorial oficial
Método ELISA
Anti-corpos específicos
Anti-corpos monoclonais de rato
„
„
„
„
Filipe Nunes_Set2005
Desenvolvido para a Vita pelo “Central
Science Laboratory” & “National Bee Unit”
(United Kingdom)
„
A base do kit de diagnóstico
Y
Y
Y
Y
Y
Placa absorvente
Y
Y
Y
Y Y
Membrana
Y
Y
Y
Y
Filipe Nunes_Set2005
Y
Y Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y Y
Y
Y Y YY
Y
YY
YY
Controle
Y
Y
Placa de descarga
Flux
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
AFB spore
Y
Teste
Y
Y
Y
Y
Y
AFB specific
monoclonal
antibodies
Species specific
antibodies
Y
Y
Y
Y
Duração : 3 minutos
Y
AFB specific antibodies
on Latex beads
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Funcionamento do teste
Y
Y
Filipe Nunes_Set2005
Espátula
Solvente
Pipeta
Placa de teste
MODO DE UTILIZAÇÃO
Filipe Nunes_Set2005
1.b) Agita-se de forma a macerar bem as larvas
durante 20 segundos
1.a) Retira-se 1 a 3 larvas suspeitas que se
colocam no frasco com a solução tampão
MODO DE UTILIZAÇÃO
Filipe Nunes_Set2005
2.b) Deitam-se 2 gotas no receptáculo redondo do
teste e espera-se 3 min. para fazer a leitura
2.a) Retira-se um pouco do liquido resultante das
larvas esmagadas com a pipeta
MODO DE UTILIZAÇÃO
Filipe Nunes_Set2005
1 linha = ausência de AFB
2 linhas = presença de AFB
RESULTADO, Leitura do teste:
Filipe Nunes_Set2005
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
1.4
1.6
1.8
250
500
2000
4000
8000
Dilution factor of the antibodies (1/x)
1000
16000
32000
Detecção mesmo após diluições de 4´000 x
SENSIBILIDADE DO TESTE APÓS DILUIÇÃO
Absorbance after 1 hour at 405nm
Filipe Nunes_Set2005
0
100
200
300
400
500
0
2
CLAREZA DA LINHA DE TESTE
1
3
Relação entre o teste e a quantidade de esporos
Milhões de Esporos por ml
Muito sensível
Detecção das larvas doentes
Confirmação de diagnóstico
„
„
„
Filipe Nunes_Set2005
Específico para AFB
„
SENSIBILIDADE E LIMITES
Filipe Nunes_Set2005
Fácil de usar
Resultado rápido
Sensível e preciso
Confidencial
Mais barato que a análise
laboratorial clássica
„
„
„
„
„
CONCLUSÃO