XXV CONGRESSO BRASILEIRO DE ZOOTECNIA ZOOTEC 2015
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XXV CONGRESSO BRASILEIRO DE ZOOTECNIA ZOOTEC 2015
XXV CONGRESSO BRASILEIRO DE ZOOTECNIA ZOOTEC 2015 Dimensões Tecnológicas e Sociais da Zootecnia Fortaleza – CE, 27 a 29 de maio de 2015 Sensibilidade a antimicrobianos de cepas bacterianas isoladas em Trachemys scripta elegans (Wied, 1839)1 Sensitivity to antimicrobial bacterial strains isolated in Trachemys scripta elegans (Wied, 1839) Fernando Bezerra da Silva Sobrinho2, Gisele Veneroni Gouveia3, Maria da Conceição Aquino de Sá4, Mateus Matiuzzi Costa5, Marcelo Domingues Faria6, Vanessa Sobue Franzo7, Aloisio Scalla Vulcani8 Adriana Gradela9 1 Parte do Projeto de Pesquisa “Caracterização molecular e sensibilidade a antimicrobianos de cepas bacterianas encontradas em Trachemys scripta elegans (Wied,1839)” do ultimo autor. 2 Colaborador, Discente do Colegiado de Medicina Veterinária (CMVET) - UNIVERSIDADE FEDERAL DO VALE DO SÃO FRANCISCO (UNIVASF), Petrolina, PE, e-mail: [email protected] 3,4 Colaborador, Doutorando do Laboratório de Microbiologia e Imunologia Animal, UNIVASF; 5 Colaborador, Docente do Laboratório de Microbiologia Imunologia Animal, UNIVASF; 6 Colaborador, Docente do Laboratório de Anatomia dos Animais Domésticos e Silvestres (LAADS), UNIVASF; 7 Colaborador, Professor Adjunto do Departamento de Zootecnia e Extensão Rural, UNIVERSIDADE FEDERAL DO MATO GROSSO, UFMT; Cuiabá, MT. 8 Colaborador, Professor Adjunto, UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIÁS, UFGO; Jataí, GO. 9 Coordenador do Projeto, Docente do LAADS, UNIVASF; Resumo: Trachemys scripta elegans têm se tornado cada vez mais objeto de estudos tanto por questões conservacionistas quanto pelo aumento de sua utilização como animal de companhia. Dúvidas sobre o tipo de doenças que estes animais podem transmitir são frequentes, de modo que o conhecimento sobre os patógenos por eles albergados torna-se importante para orientação dos proprietários quanto aos cuidados com os mesmos. Este estudo objetivou verificar a sensibilidade de cepas bacterianas isoladas de swab cloacal de Trachemys scripta elegans (WIED, 1839) aos antimicrobianos testados. Vinte espécimes, 10 machos e 10 fêmeas, adultos e de diferentes idades, tiveram o swab cloacal coletado, acondicionado em meio de transporte Stuart e encaminhado sob refrigeração ao Laboratório para semeadura e avaliação da sensibilidade antimicrobiana. Todos os isolados foram sensíveis a gentamicina (90%), seguida de enrofloxacina (75%), estreptomicina (55%), doxicilina (40%), sulfazotrim (35%), ampicilina (15%) e cefalexina (10%). Por outro lado, observou-se elevada resistência a penicilina (5%) e a eritromicina (5%). Os resultados permitiram determinar características de resistência das cepas, sendo fundamental para implementar medidas corretas de tratamento e controle. Palavras–chave: antimicrobianos, bactérias, cativeiro, gentamicina, penicilina, tartarugas. Abstract: Trachemys scripta elegans have become increasingly subject of study both for preserving and the increase of its use as pets. Questions about the type of diseases that these animals can transmit are frequent, so that the knowledge of the pathogens they sheltered becomes important for the guidance of owners in caring for them. We examined the sensitivity of bacterial strains isolated from Trachemys scripta elegans (WIED, 1839) cloacal swab to tested antimicrobials. Twenty specimens, 10 males and 10 females, adults and form different ages had cloacal swab collected, packed in Stuart transport medium and sent to the laboratory under refrigeration for sowing and evaluation of antimicrobial sensitivity. All isolates were susceptible to gentamicin (90%), followed by enrofloxacin (75%), streptomycin (55%), doxycycline (40%), sulphazotrim (35%), ampicillin (15%) and cephalexin (10%). On the other hand, there was high resistance to penicillin (5%) and erythromycin (5%). The results allowed determining strength characteristics of the strains are central to implementing correct measures of treatment and control. Keywords: , antimicrobial drugs, bacterialcaptivi, gentamicina, penicilina, turtles. Introdução Trachemys scripta elegans é uma tartaruga de origem norte americana muito difundida como “pet” em todo mundo. Todavia, como é o caso no Brasil, sua comercialização ilegal e descontrolada leva ao abandono das mesmas em regiões onde não são componentes nativos da fauna. Este fato as torna uma ameaça à biodiversidade local, pois se tornam predadoras, competidoras e causadoras da extinção de outras espécies (Fonseca, 2001). A introdução de espécies exóticas, além de condenar a biodiversidade, pode também favorecer o aparecimento de pragas, doenças e gerar elevados custos para o orçamento do governo. Página - 1 - de 3 XXV CONGRESSO BRASILEIRO DE ZOOTECNIA ZOOTEC 2015 Dimensões Tecnológicas e Sociais da Zootecnia Fortaleza – CE, 27 a 29 de maio de 2015 Os tipos de doenças que podem transmitidas por répteis ao homem são um questionamento frequente em clínicas veterinárias, como também as medidas profiláticas que devem ser tomadas para prevenir a transmissão destas doenças. Péssimas condições de manejo constituem-se numa das causas mais frequentes de doenças ou processos patológicos entre as tartarugas (Bordeau, 1989) e crianças são as mais suscetíveis às infecções devido à sua propensão em colocar a mão e/ou os dedos contaminados na boca, ou mesmo beijar estes animais (Johnson-Delaney, 1996). Por isto é de extrema importância o conhecimento da microbiota inerente a estes répteis para melhor orientar os proprietários e promover uma relação humana e animal segura e saudável. Este estudo objetivou verificar a sensibilidade de cepas bacterianas isoladas em Trachemys scripta elegans (Wied, 1839) aos antimicrobianos testados. Material e Métodos Foram utilizadas 20 tartarugas Trachemys scripta elegans (Wied, 1839), sendo 10 machos e 10 fêmeas, adultos e de diferentes idades, capturadas no Parque Ecológico do Tietê, São Paulo – SP, as quais foram transportadas até o Campus de Ciências Agrária da Universidade Federal do Vale do São Francisco (UNIVASF), Petrolina, PE onde foram mantidas em cativeiro. Este estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética e Deontologia em Estudos e Pesquias – CEDEP da UNIVASF (protocolo nº 0002/130314). Após identificação dos espécimes realizou-se a coleta de amostras para análises bacteriológicas através de swabs da região cloacal utilizando-se swab estéril, o qual foi mantido e rotacionado dentro da cloaca do animal por aproximadamente um minuto e, então, acondicionado em meio de transporte Stuart e encaminhado sob refrigeração ao Laboratório de Microbiologia e Imunologia Animal da UNIVASF, onde foram realizados os demais procedimentos. O perfil de sensibilidade dos microrganismos foi determinado através do método de difusão em disco Kirby-Bauer modificado (Bauer et al., 1966). Os isolados foram inoculados em caldo Muller Hinton e incubados a 37ºC até obtenção de turvação conforme a escala 0,5 de Mac Farland. Com auxilio de um swab estéril, os isolados foram semeados em placas de Petri contendo meio de cultura Agar Muller Hinton. Logo apos, foram aplicados os discos impregnados com as drogas antimicrobianas na dose de 10,0 mcg para estreptomicina, cefalexina, eritromicina, doxiclina, gentamicina, sulfazotrim, penicilina, ampicilina e 0,10 mcg pra enrofloxacina. As placas foram incubadas em estufa durante 24h a 37ºC. Após a leitura dos halos (Fig. 1), foi determinado o perfil de sensibilidade dos isolados. Figura 1: Método de difusão em disco Kirby-Bauer modificado para avaliação de sensibilidade aos antimicrobianos. Resultados e Discussão Todos os isolados foram sensíveis à gentamicina (90%), seguida da enrofloxacina (75%), estreptomicina (55%), doxicilina (40%), sulfazotrim (35%), ampicilina (15%) e cefalexina (10%). Por outro lado, observou-se elevada resistência a penicilina (5%) e a eritromicina (5%) (Figura 1). Germino et al. (2008) observaram que todos os isolados das cavidades bucal e cloacal de serpentes, jacaré e jabutis foram sensíveis a ciprofloxacina e amicacina e que houve elevada resistência a lincomicina, penicilina, rifamicina e a ampicilina. Página - 2 - de 3 XXV CONGRESSO BRASILEIRO DE ZOOTECNIA ZOOTEC 2015 Dimensões Tecnológicas e Sociais da Zootecnia Variação de sensibilidade Fortaleza – CE, 27 a 29 de maio de 2015 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 Figura 1: Variação de sensibilidade de isolados de bacilos Gram negativos aos antimicrobianos: Doxicilina (DOX), sulfazotrim (SUT), ampicilina (AMP), eritromicina (ERI), gentamicina (GEN), penicilina (PEN), estreptomicina (EST), cefalexina (CEF), enrofloxacina (ENO). Segundo Srinivisan et al. (2007), inúmeros são os exemplos do aumento da resistência aos antimicrobianos em diversas espécies animais, sendo que muitos dos microrganismos apresentam resistência aos antimicrobianos de uso humano, o que é preocupante, pois as bactérias isoladas podem ser reservatório de genes resistentes, com papel na disseminação desta resistência às bactérias patogênicas e comensais. Conclusões Os resultados permitiram determinar as características de sensibilidade e de resistência antimicrobiana dos isolados cloacais de Trachemys scripta elegans, sendo os antibióticos mais efetivos a gentamicina, enrofloxacina e estreptomicina e os menos efetivos a penicilina e a eritromicina, sendo fundamentais para implantação de medidas corretas de tratamento e controle. Literatura citada BAUER, A.W.; KIRBY, W.M.; SHERRIS, J.C.; TURCK, M. Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk method. American Journal of Clinical Pathology, v. 45, n.4, p. 493-496, 1966. BORDEAU, P. Pathologie des tortues 3e partie: affections respiratoires, autres affections d’organes et thérapeutique Point Vétérinaire. v. 21, n. 119, p. 45-62, 1989. FONSECA, F.O. Olhares sobre o lago Paranoá. Brasília: SEMARH, 2001. 425 p. GERMINO, G.F.S.; FRANCO, I.; PEIXOTO, R.M.; SEABRA, A.G.L.; GAMOSA, E.A.; DUTRA, V.; KREWER, C.C.; COSTA, M.M. Isolamento e sensibilidade aos antimicrobianos de isolados de répteis mantidos em cativeiro em Petrolina-PE. In: http://www.sovergs.com.br/conbravet2008/anais/cd/resumos/R0579-3.pdf JOHNSON-DELANEY, C.A. Reptile zoonoses and threats to public helth. In: MADER, D.R. Reptile medicine and surgery. Londres: W.B. Saunders Company, 1996. P. 20-33. SRINIVISAN, V.; GILLESPIE, B. E.; LEWIS, M. J.; NGUYEN, L. T.; HEADRICK, S. I.; SCHUKKEN, Y. H.; OLIVER, S. P. Phenotypic and genotypic antimicrobial resistance patterns of Escherichia coli isolated from dairy cows with mastitis. Veterinary Microbiology, Amsterdam, v. 124, n. 3, p. 319-328, 2007. 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