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Avaliação in vitro do sêmen de touro da raça Senepol pós-descongelado rediluído em solução de água de coco em pó (ACP-111®) e submetido ao teste de termorresistência 1 Luara Lima Pôrto Carvalho2*, Jéssica Sebastião dos Santos3, Homero Batista da Rocha3, Daniela Kunkel4, Thales Rodrigues Costa2, Manoel Lopes da Silva Filho5, Milena Rayana Neres Brauna2, Sijaria Nunes Silva2 1 Relatório de Estágio Supervisionado Obrigatório I, UFPI. Graduanda(o) em Medicina Veterinária, CPCE/UFPI, Bom Jesus, PI. [email protected] Médico(a) Veterinário(a), Bom Jesus, PI. 4 Professora substituta, CPCE/UFPI, Bom Jesus, PI. 5 Professor adjunto, CPCE/UFPI, Bom Jesus, PI. 2 3 Resumo: Objetivou-se avaliar o sêmen bovino da raça Senepol rediluído em ACP-111® submetido ao teste de termorresistência. Utilizou-se 10 doses de sêmen divididas em 2 grupos (Controle e ACP-111®). As palhetas foram descongeladas e o conteúdo seminal dividido em partes iguais, sendo uma submetida a rediluição em ACP-111® e avaliado por 2 horas. A análise estatística utilizada foi o teste de Friedman. O sêmen bovino em ACP-111® apresenta viabilidade significativa no teste de termorresistência. Palavras-chave: bovinos, criopreservação, diluente seminal In vitro evaluation of the race of bull semen after thawing Senepol rediluted in coconut water solution powder (ACP-111®) and subjected to the heat resistance test Abstract: Aimed to evaluate the semen bovine breed Senepol rediluted in ACP-111® subjected to heat resistance test. 10 was used semen doses divided into 2 groups (control and ACP-111®). Straws were thawed and the seminal contents divided into equal parts, one subjected to reACP-111® dilution and assessed for 2 hours. The statistical analysis was used the Friedman test. The bovine semen in ACP-111® shows significant viability in the heat resistance test. Keywords: bovine, cryopreservation, seminal diluente Introdução A produtividade da pecuária nacional tem aumentado com o emprego de biotecnologias que otimizam o sistema de produção (CELEGHINI et al., 2008). Por conta disso, tem-se tornado de fundamental importância, tecnologias de criopreservação, que visam o aprimoramento de novas técnicas e diluentes, na tentativa de minimizar a perda de células viáveis durante estes processos (PANAZOLLO, 2007). Diante disso objetivou-se avaliar in vitro o semen de touro da raça senepol pós-descongelado rediluido em ACP-111® submetidos ao teste de termorresistência. Material e Métodos O experimento foi realizado no Laboratório de Reprodução Animal da Universidade Federal do Piauí, Campus Professora Cinobelina Elvas, Bom Jesus, Piauí. Utilizou-se 10 palhetas de sêmen congelado (ABS PECPLAN®) de 0,5 mL de touro da raça Senepol, apresentando os parâmetros espermáticos viáveis de acordo com a central de fornecimento das doses. O água de coco em pó (ACP-111®) foi preparado de acordo com o recomendado pelo fabricante, 3,4 gramas dissolvidos em 50 mL de água destilada. As palhetas foram previamente descongeladas em banho Maria a 37 °C por 30 segundo e logos após feita uma avaliação imediata da viabilidade do sêmen. Cada palheta teve seu conteúdo espermático dividido em duas partes iguais, o grupo controle permaneceu com diluição feita pelo fabricante e a outra rediluida em ACP-111® e posteriormente submetendo os espermatozoides ao teste de termorresistência com auxílio de um microscópio óptico (100 a 400x) lâmina e lamínula pré-aquecidas avaliou-se motilidade (%) e vigor (0 a 5) nos tempos de 5, 10, 15, 30, 60 e 120 minutos. Para análise estatística dos resultados obtidos, os dados observados foram submetidos ao teste de Friedman (P<0,05). Resultados e Discussão Tabela 1. Avaliação in vitro do sêmen de touros da raça senepol descongelado rediluido em ACP-111® submetido ao teste de termorresistência por 2 horas. Pós-descongelação Motilidade (%) Vigor Tempo Controle (Tris) ACP-111® Controle (Tris) ACP-111® 05 min. 74,00±4,75a 76,00±6,25b 3,40±4,56a 3,80±6,50b 10 min. 74,00±4,70a 76,00±6,20b 3,40±4,75a 4,20±6,43b 15 min. 65,00±4,50a 67,00±4,25a 3,00±5,40a 3,80±5,57a 30 min. 60,00±5,42a 62,00±5,50a 3,00±5,47a 3,40±5,60a 60 min. 58,00±5,55a 62,00±5,62b 2,80±8,50a 3,20±4,50b 120 min. 26,00±8,70a 44,00±7,50b 2,20±8,63a 3,20±6,75b Letras diferentes (a,b) na mesma linha indicam diferença estatística (P<0,05). Conforme resultados estatísticos obtidos para motilidade espermática (tabela 1) observa-se que o grupo testado rediluido (ACP-111®) obteve os melhores resultados nos tempos de 05, 10, 60 e 120 minutos de avaliação, quando comparado ao grupo controle. Os resultados obtidos para vigor (tabela 1) utilizando o ACP-111® demonstraram serem estatisticamente superiores ao grupo controle (Tris) nos tempos de 05, 10, 60 e 120 minutos. Oliveira, et al., (2011) Constataram maior viabilidade in vitro de espermatozoides caprinos usando o diluente a base de tris após descongelação submetidos ao teste de termorresistência a 37 °C. Entretanto observaram que os parâmetros cinéticos dos espermatozoides diluídos e congelados-descongelados, após 5 minutos de incubação a 37 °C, apresenta potencialidade na congelação seminal de bodes (OLIVEIRA et al., 2011). Conclusão O sêmen de touro da raça senepol rediluido em ACP-111® submetido ao teste de termorresistência in vitro apresenta viabilidade significativa, demostrando ser uma possível alternativa para uso em biotécnicas reprodutivas. Referências CELEGHINI, E.C.C.; ARRUDA, R.P.; ANDRADE, A.F.C.; NASCIMENTO, J.; RAPHAEL, C.F.; RODRIGUES, P.H.M. Effects that bovine sperm cryopreservation using two diferente extenders has on sperm membranes and chromatin. Animal Reproduction Science, v. 104, p. 119-131, 2008. OLIVEIRA R. V.; NUNES J. F.; SALGUEIRO C. C. M.; CAVALCANTE J. M. M.; BRASIL O. O.; MOURA A. A. A. N. Avaliação de espermatozoides caprinos congelados em meio à base de água de coco em pó (ACP-101) ou tris. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v.6, n.6, p. 1295-1302, 2011 PANAZOLLO. Avaliação de espermatozoides submetidos ao teste de termoresistência após a descongelação e diluição em pbs (phosphatebuffered saline) ou fluído prostático canino. 2007. Escola de Veterinária, Pontifícia Universidade Católica, Paraná. (disponível em: http://www2.pucpr.br/reol/index.php/SEMIC19?dd1=5333&dd99=view); acesso em 29/09/2015.