TCBS Agar, Ágar TCBS, Product Information, Portuguese

ÁGAR TCBS – TCBS AGAR (7210)
Uso Previsto
O Ágar TCBS é utilizado para o isolamento seletivo de Vibrio cholerae e outros víbrios enteropatogênicos.
Sumário e Explicação do Produto
O Ágar TCBS é uma abreviação do Ágar Tiossulfato-Citrato-Bile-Sacarose. Esse ágar também é chamado
de Ágar Seletivo para Víbrio e é preparado de acordo com a fórmula de Kobayashi et al.1 Esta fórmula é uma
modificação do meio seletivo de Nakanishi.2 Todos os Vibrio spp. patogênicos com exceção do Vibrio
hollisae, crescerão no Ágar TCBS. Este ágar altamente seletivo fornece os nutrientes necessários para o
Vibrio spp. e permite a competição entre os víbrios e a flora intestinal. Vibrio spp. são capazes de crescer em
meio contendo altas concentrações de sal e algumas espécies são halofílicas.3 Infecções têm sido
associadas com a ingestão de água contaminada e consumo de mariscos ou frutos do mar. Vibrio spp. são
habitantes naturais da água do mar.3
O Ágar TCBS é recomendado para o isolamento de Vibrio spp. provenientes de espécimes fecais4 e é
especificado em métodos padrões para teste de alimentos.5,6
Princípios do Procedimento
Extrato de Levedura, Digestão Enzimática de Caseína e Digestão Enzimática de Tecido Animal fornecem
nitrogênio, vitaminas e aminoácidos no Ágar TCBS. O Citrato de Sódio, Tiossulfato de Sódio, Colato de
Sódio e Bile Bovina são agentes seletivos, fornecendo um pH alcalino para inibir organismos Gram-positivos
e inibir coliformes. Um aumento no pH é utilizado para propiciar o crescimento de Vibrio cholerae, porque
este organismo é sensível a ambientes ácidos. A sacarose é o carboidrato fermentável. O Cloreto de Sódio
estimula o crescimento do organismo e mantém o equilíbrio osmótico do meio. O Tiossulfato de Sódio
também é uma fonte de enxofre e junto com o Citrato Férrico age como um indicador para detectar a
produção de sulfeto de hidrogênio. Azul de Bromotimol e Azul de Timol são os indicadores de pH. O ágar é o
agente solidificante.
Fórmula / Litro
Extrato de Levedura.................................................................. 5 g
Digestão Enzimática de Caseína .............................................. 5 g
Digestão Enzimática de Tecido Animal .................................... 5 g
Citrato de Sódio ...................................................................... 10 g
Tiossulfato de Sódio ............................................................... 10 g
Bile Bovina ................................................................................ 5 g
Colato de Sódio ........................................................................ 3 g
Sacarose ................................................................................. 20 g
Cloreto de Sódio ..................................................................... 10 g
Citrato Férrico ........................................................................... 1 g
Azul de Bromotimol .............................................................. 0,04 g
Azul de Timol ....................................................................... 0,04 g
Ágar ....................................................................................... *14 g
*10 - 15 g de acordo com a consistência do gel
pH Final: 8,6 ± 0,2 a 25°C
A fórmula pode ser ajustada e/ou suplementada conforme necessário para atender as especificações de desempenho.
Precauções
1. Somente para o uso em laboratório
2. IRRITANTE. Irritante para os olhos, sistema respiratório e pele.
PI7210, Rev 5, Agosto 2015
Modo de Preparo
1. Suspenda 88 g do meio em 1 L de água purificada.
2. Aqueça, agitando frequentemente e ferva por 1 minuto para dissolver completamente o meio.
3. NÃO AUTOCLAVE.
Especificações de Controle de Qualidade
Aparência Desidratado: O pó é homogêneo, fluxo livre e de bege claro a bege esverdeado.
Aparência Preparado: O meio preparado apresenta coloração verde floresta e é levemente turvo.
Resposta Esperada de Cultivo: Resposta de cultivo no Ágar TCBS a 35 ± 2°C após 18 - 48 horas de
incubação.
Micro-organismo
Enterococcus faecalis ATCC® 29212
Escherichia coli ATCC® 25922
Vibrio alginolyticus ATCC® 17749
Vibrio cholerae ATCC® 9459
Vibrio parahaemolyticus ATCC 17802
Inóculo Aproximado
(UFC)
104 a 105
104 a 105
10 - 300
10 - 300
10 - 300
Resposta
Reações
Nitidamente
oprimido a
inibido
Se recuperado,
colônias
translúcidas e
pequenas
Inibido
Crescimento
Crescimento
Crescimento
--Amarelo
Amarelo
Verde
Os organismos listados são os mínimos que devem ser avaliados para o teste de controle de qualidade.
Procedimento do Teste
Para a discussão completa sobre o isolamento e identificação de Vibrio cholerae e outros víbrios
enteropatogênicos, refira-se aos procedimentos específicos.
Resultados
Após 18 – 48 horas de incubação a 35 ± 2°C, víbrios fermentadores de sacarose (V. cholerae, V.
alginolyticus, V. hareyi, V. cincinnatiensis, V. fluvialis, V. furnissii, V. metschnikovii, e alguns V. vulnificus)
apresentam colônias lisas, opacas e com bordas amarelas finas no Ágar TCBS.3
Armazenamento
Armazene o frasco contendo o meio desidratado devidamente fechado entre 2 - 30°C. Uma vez aberto e
fechado novamente, coloque o frasco em um ambiente de baixa umidade e na mesma temperatura de
armazenamento. Proteja contra a umidade e luz mantendo o frasco firmemente fechado.
Validade
Refira-se à data de validade no frasco. O meio desidratado deve ser descartado se não fluir livremente ou se
houver mudança na coloração original. A validade se aplica ao meio em sua embalagem intacta quando
armazenado como indicado.
Limitações do Procedimento
1.
2.
3.
4.
5.
Devido à variação nutricional, algumas cepas podem apresentar um crescimento fraco ou ausência de crescimento
neste meio. Mais testes são necessários para a confirmação de Vibrio spp.
No isolamento inicial, V. parahaemolyticus pode ser confundido com Aeromonas hydrophila, Plesiomonas
shigelloides e Pseudomonas spp.7
Proteus spp. fermentadores de sacarose produzem colônias amarelas que podem parecer com colônias de Vibrio.8
TCBS é um meio insatisfatório para o teste de oxidase de Vibrio spp.9
Algumas cepas de V. cholerae podem ser verdes ou incolores no Ágar TCBS Agar devido a fermentação tardia da
sacarose.8
PI7210, Rev 5, Agosto 2015
Embalagem
Ágar TCBS
N° Código
7210A
7210B
7210C
500 g
2 kg
10 kg
Referências
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
Kobayashi, T., S. Enomoto, R. Sakazaki, and S. Kuwahara. 1963. A new selective medium for pathogenic vibrios, TCBS
(modified Nakanishi’s agar). Jpn, J. Bacteriol. 18:387.
Nakanishi, Y. 1963. An isolation agar medium for cholerae and enteropathogenic halophilic vibrios. Modern Media. 9:246.
Baron, E. J., L. R. Peterson, and S. M. Finegold. 1994. Vibrio and related species, Aeromonas, Plesiomonas, Campylobacter,
Helicobacter, and others, p. 429-444. Bailey & Scott’s diagnostic microbiology, 9th ed. Mosby-Year Book, Inc. St. Louis, MO.
Murray, P. R., E. J. Baron, M. A. Pfaller, F. C. Tenover, and R. H. Yolken (eds.). 1995. Manual of clinical microbiology, 6th ed.
American Society for Microbiology, Washington, D.C.
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Vanderzant, C. and D. F. Splittstoesser (eds.). 1992. Compendium of methods for the microbiological examination of food. 3rd
ed. American Public Health Association, Washington, D.C.
Bottone, E. J., and T. Robin. 1978. Vibrio parahaemolyticus; Suspicion of presence based on aberrant biochemical and
morphological features. J. Clin. Microbiol. 8:760.
MacFaddin, J. D. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-maintenance of medical bacteria, vol.1, p. 763-767. Williams
& Wilkins, Baltimore, MD.
Morris, G. K., M. H. Merson, I. Huq, A. Kibrya, and R. Black. 1979. Comparison of four plating media for isolating Vibrio
cholerae. J. Clin. Microbiol. 9:79.
Informação Técnica
Contate a Neogen do Brasil para Serviços Técnicos ou questões envolvendo a preparação ou desempenho do meio de cultura
desidratado no telefone 19.3935-3727.
Contate a Acumedia Manufacturers, Inc. para Serviços Técnicos ou questões envolvendo a preparação ou desempenho do meio de
cultura desidratado no telefone +1 (517)372-9200 ou fax +1 (517)372-2006.
PI7210, Rev 5, Agosto 2015