Strep A Test Biocon - Aprovada 22 de Novembro 2010

Strep A Test Biocon
Cód: Z98230BN.T
FINALIDADE
PROCEDIMENTO
O Strep A Test Biocon é um imunoensaio cromatográfico rápido e
qualitativo para a detecção do antígeno de Streptococcus do grupo A em
swab de garganta.
Deixar que a tira teste, reagentes e/ou controles atinjam a temperatura
ambiente (15-30°C) antes da realização do teste.
SIGNIFICADO CLÍNICO
O Streptococcus do Grupo A Beta-hemolítico é uma das principais causas
de infecções respiratórias como amigdalite, faringite e febre escarlate. O
diagnóstico e tratamento precoce de faringite estreptocócica do Grupo A
tem mostrado redução à gravidade dos sintomas e complicações, tais
como a febre reumática e a glomerulonefrite.
Os métodos convencionais utilizados para a detecção da doença dependem
do isolamento e posterior identificação do organismo. Estes métodos
geralmente requerem 24-48 horas para serem concluídos. O recente
desenvolvimento de técnicas imunológicas que podem detectar o antígeno
de Streptococcus do grupo A diretamente por swab de garganta permitem
que os médicos possam diagnosticar e administrar a terapia imediatamente.
PRINCÍPIO
O Strep A Test Biocon é um imunoensaio cromatográfico de fluxo lateral
qualitativo para a detecção do antígeno Strep A em amostras de swab de
garganta. Nesse teste, um anticorpo específico para o antígeno Strep A é
revestido na região da linha teste (T) da tira. Durante o ensaio, a amostra
extraída por swab de garganta reage com um anticorpo para Strep A, que é
revestido em partículas. A mistura migra para a membrana para reagir com
o anticorpo para Strep A na membrana e gerar uma linha colorida na região
teste (T). A presença dessa linha colorida na região teste (T) indica um
resultado reagente, enquanto sua ausência indica um resultado não
reagente. Para servir de controle processual, uma linha colorida sempre
aparecerá na região controle se o teste for realizado corretamente. Se a
linha controle colorida não aparecer, o resultado do teste não é válido.
1. Retirar a tira teste da embalagem hermeticamente fechada e usá-la o
mais rápido possível. Melhores resultados serão obtidos se o teste for
realizado imediatamente após a abertura da embalagem de alumínio.
2. Segurar o frasco de Reagente A de cabeça para baixo e adicionar 4 gotas
cheias (aprox. 240 µL) a um tubo de extração. O reagente A é de cor
vermelha. Manter o frasco de Reagente B na vertical adicionar 4 gotas
cheias (aprox. 160 µL) ao tubo. O reagente B é incolor. A adição do
Reagente B para Reagente A muda a cor da solução de vermelho para
amarelo-pálido. Tocar no fundo do tubo suavemente para misturar o
líquido.
3. Imediatamente adicionar o swab de garganta no tubo da solução
amarelo pálido. Girar o swab 10 vezes no tubo. Deixar o swab no tubo
durante 1 minuto. Depois pressionar o swab contra a parede e o fundo do
tubo durante a remoção da haste de forma que a maioria do líquido fique
no tubo. Descartar o swab.
4. Com as setas apontando para baixo, colocar a tira teste no tubo da
solução e, em seguida, iniciar o cronômetro. Se o procedimento for
seguido corretamente, o líquido deve ser igual ou um pouco abaixo da
linha máxima (MAX) sobre a tira teste.
5. Deixar a tira no tubo e ler o resultado em 5 minutos. Nota: Concentrações
muito baixas de Strep A podem resultar em uma linha fraca que aparece
na região teste (T) após um período prolongado de tempo; portanto, não
leia o resultado após 10 minutos.
ARMAZENAGEM
Todos os reagentes inclusos no teste devem ser armazenados à
temperatura de 2 a 30°C.
CUIDADOS E PRECAUÇÕES
 Os reagentes de extração A e B são ligeiramente cáusticos. Evitar o
contacto com os olhos ou membranas mucosas. Em caso de contato
acidental, lavar abundantemente com água.
 Os controles negativos e positivos contêm azido de sódio que pode
reagir com chumbo ou cobre formando azidos metálicos explosivos. Ao
eliminar essas soluções, sempre lave abundantemente com água para
evitar a acumulação de azida.
 Orientações padrão para a manipulação de agentes infecciosos e
reagentes químicos devem ser observadas em todos os procedimentos.
Todos os resíduos contaminantes, como swabs, dispositivos de teste
Strep A e extratos devem ser adequadamente descartados.
INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS
NÃO REAGENTE: Uma linha colorida aparece na região controle (C).
Nenhuma linha colorida é visível na região teste (T). Isso indica que não
foram detectados antígenos Strep A.
REAGENTE: Além de uma linha colorida na região controle (C), uma linha
colorida aparece na região teste (T). Essas linhas podem ser de
intensidades diferentes. Isso indica que a amostra contém antígeno Strep
A.
MATERIAIS
Materiais Fornecidos
 Tira teste
 Reagente de extração A
 Reagente de extração B
 Tubos de extração
 Swab estéril
 Estação de trabalho
 Controle positivo
 Controle Negativo
 Instruções de uso
Materiais Necessários e Não Fornecidos
 Cronômetro
COLETA E PREPARAÇÃO DA AMOSTRA
 Só utilize reagentes e swabs estéreis fornecidos no kit.
 Coletar amostra da garganta com os swabs estéreis que são fornecidos
no kit. Swab da faringe posterior, das amígdalas e de outras áreas
inflamadas. Evite tocar a língua, bochechas e dentes com o swab.
 O teste deve ser realizado imediatamente após as amostras serem
coletadas. Amostras de swabs podem ser armazenadas em
temperatura ambiente por até quatro horas antes do teste.
INVÁLIDO: Nenhuma linha aparece na região controle (C). Isso indica um
possível erro na execução do teste. Um novo teste deve ser realizado.
CONTROLE DE QUALIDADE
Controle de Qualidade Interno
Controles internos processuais estão inclusos no teste. Uma linha colorida
aparecendo na região controle (C) é um controle de procedimento interno.
Ela confirma volume de amostra suficiente e técnica de procedimento
correta. Um fundo claro é um controle interno de fundo negativo. Se o teste
estiver funcionando corretamente, o plano de fundo na janela de resultados
deve ser branco ao rosa claro e não deve interferir com a capacidade de ler
o resultado do teste.
Controle de Qualidade Externo
Executar controles positivos e negativos de acordo com o procedimento
interno do laboratório. Recomenda-se que um controle positivo e negativo
sejam executados a cada 25 testes e para cada operador realizando testes
do kit. Controles externos positivos e negativos são fornecidos no kit.
Alternativamente, outras cepas de referência de Streptococcus ATCC do
grupo A e não Grupo A podem ser utilizadas como controle externo. Alguns
controles comerciais podem conter conservantes interferindo no teste,
portanto, outros controles comerciais não são recomendados.
Procedimento de Teste de Controle de Qualidade Externo
1. Adicionar 4 gotas de Reagente A e 4 gotas de Reagente B num tubo de
ensaio de extração. Tocar no fundo do tubo suavemente para misturar o
líquido.
2. Adicionar 1 gota completa de solução controle positiva ou negativa para
o tubo, mantendo o frasco ereto.
3. Colocar um swab limpo dentro do tubo. Girar o swab 10 vezes. Deixar o
swab no tubo durante 1 minuto. Depois pressionar o swab contra a
parede e o fundo do tubo durante a remoção da haste de forma que a
maioria da amostra líquida fique no tubo. Descartar o swab.
4. Continuar com o passo 4 do item procedimento.
LIMITAÇÕES
Classificação de
Cultura Positiva
Raro
1+
2+
3+
4+
Teste Rápido/Cultura
% Exatidão
10/11=
9/9=
17/19=
36/37=
48/48=
91
100
89
97
100
Reatividade Cruzada
Os seguintes organismos foram testados a 1,0 x 107 organismos por teste e
apresentaram resultado negativo quando testado com o Strep A Test
Biocon. Cepas de produção não mucóides foram testados.
Streptococcus do grupo B
Streptococcus do grupo F
Streptococcus do pneumoniae
Streptococcus mutans
Staphylococcus aureus
Corynebacterium
Candia albincans
Pseudomonas aeruginosas
Neisseria meningitidis
Neisseria sicca
Branhamella catarrhalis
Streptococcus do grupo C
Streptococcus do grupo G
Streptococcus sanguis
Enterococcus faecalis
Staphylococcus
Serratia marcescens
Klebsiella pneumoniae
Bordetella pertussis
Neisseria gonnorhea
Neisseria subflava
Hemophilus influenza
BIBLIOGRAFIA
 O Strep A Test Biocon é somente para uso diagnóstico in vitro. O teste
deve ser usado apenas para a detecção de antígeno Strep A em
amostras de swab da garganta. Nenhum valor quantitativo nem taxa de
aumento da concentração de antigénio Strep A pode ser determinada
por este teste qualitativo.
 Este teste vai apenas indicar a presença de antígeno Strep A em
amostras de bactérias Streptococcus do grupo A , viáveis e não viáveis.
 Um resultado não reagente obtido a partir deste kit deve ser confirmado
pela cultura. Um resultado não reagente pode ser obtido se a
concentração de antígeno Strep presente no swab de garganta não for
adequada ou abaixo do nível de detecção do teste.
 Os swabs estéreis fornecidos com esse teste devem ser utilizados para
a coleta da amostra. Outros swabs não foram validados com esse teste.
 O excesso de sangue ou muco na amostra de swab pode interferir no
desempenho do teste e pode dar um resultado falso-positivo. Evite tocar
a língua, bochechas, dentes e as áreas de sangramento da boca com o
swab quando coletar amostras.
 Como todos os testes diagnósticos, todos os resultados devem ser
interpretados em conjunto com outras informações clínicas disponíveis
para o médico.
1. Facklam, R.R. and Carey, R.B., Streptococci and aerococci, Manual of
Clinical Microbiology, 4th ed., Lennette, E.H., Balows, A., Hausler, W.J.
and Shadomy, H.J. (eds), American Society for Microbiology, 1985, PP
154-175.
2. Levinson, M.L. and Frank, P.F., Differentiation of Group A from other Beta
Haemolytic Streptococci with Bacitracin, J. Bacteriol., 69, 284- 287
(1955).
3. Edwards, E.A., Phillips, I.A., and Suiter, W.C., Diagnosis of Group A
Streptococcal Infections Directly from Throat Secretions, J. Clin. Micro.,
15, 481-483 (1982).
4. Gupta, R., Talwar, G.P., and Gupta, S.K., Rapid Antibody Capture Assay
for Detection of Group A Streptococci Using Monoclonal Antibody and
Colloidal Gold-Monospecific Polyvalent Antibody Conjugate, J.
Immunoassay, 13, 441-445 (1992).
5. Ross, P.W., Throat Swabs and Swabbling Technique, The Practitioner,
207, 791-796 (1971).
6. Lauer, B.A. Reilar, L.B. and Mirrett, S., Effect of Atmosphere and
Duration of Incubation on Primary Isolation of Group A Streptococci from
Throat Cultures, J. Clin. Micro., 17, 338-340 (1983).
CARACTERÍSTICAS DE DESEMPENHO
APRESENTAÇÃO DO KIT
Usando três centros médicos de avaliação, um total de 499 swabs de
garganta foram coletados de pacientes apresentando sintomas de
faringite. Cada swab foi rolado sobre uma placa de ágar sangue de
carneiro, e em seguida testado pelo Strep A Test Biocon. As placas foram
para o isolamento, e em seguida incubadas a 37°C com 5-10% de CO2 e um
disco de Bacitracina por 18-24 horas. As placas de cultura negativas foram
incubadas por 18-24 horas adicionais. Possíveis colônias Streptocaccus
do Grupo A (GAS) foram sub-cultivadas e confirmadas com um grupo,
comercialmente disponível, de kit de aglutinação em látex. Das 499
amostras totais, 375 foram consideradas negativas por cultura e 124 foram
consideradas positivas pela cultura. Durante este estudo, duas amostras
de Streptococcus F renderam resultados positivos com esse teste. Uma
dessas amostras foi re-cultivada, em seguida, re-analisada e gerou um
resultado negativo. Três novas cepas de Streptococcus F foram cultivadas
e testadas para a reatividade cruzada e também produziram resultados
negativos.
Método
Resultados
Strep A
Reagente
Test
Biocon
Não Reagente
Resultado Total
Cultura
Reagente
Não Reagente
120
20
4
355
124
375
Sensibilidade: 120 / 124 = 97% (91% a 99%) *
Especificidade: 355 / 375 = 95% (92% a 97%) *
Precisão: 475 / 499 = 95% (93% a 97%) *
Prevalência: 124 / 499 = 25%
PPV (+): 120 / 140 = 86% (79% a 91%) *
NPV (-): 355 / 359 = 99% (97% a 100%) *
* Indica um intervalo de confiança de 95%
Resultado
Total
140
359
499
1. Dispositivo de teste 1 x 20
2. Reagente de extração A 1 x 5 mL
3. Reagente de extração B 1 x 5 mL
4. Tubo de extração 1 x 20
5. Controle Positivo 1 x 1 mL
6. Controle Negativo 1 x 1 mL
7. Swab esterilizado 1 x 20
8. Estação de Trabalho: 1
9. Instruções de uso: 1
Nº de testes: 20 testes.
ATENDIMENTO AO CONSIMIDOR
Em caso de dúvidas sobre o produto entrar em contato através de:
Telefax: (31) 2552-8384
E-mail: [email protected]
TERMO DE GARANTIA
O referido kit é responsabilidade da Biocon, desde que haja comprovação
de regularidade na conservação, manuseio e na execução do teste pela
assessoria técnica. Qualquer sinal de integridade física abalada ou
validade expirada isenta a Biocon e seus distribuidores da responsabilidade
por falha no desempenho do kit sob as condições acima mencionadas.
DISTRIBUIDO POR: DIAGNÓSTICA
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Revisado em: 22/11/2010.